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新品 | 培养基消耗分析—106种化合物测定

分类:
阿趣动态
发布时间:
2020/01/20 10:52
浏览量
 
代谢组学
 
还在为如何简化测定培养基成分的流程发愁?
还在为如何保证测定培养基成分的稳定担忧?
还在为如何缩短测定培养基成分的时间烦恼?
...
 
快来了解一下BIOTREE的新力作——培养基消耗分析
(文末附有检测物简表)
 
产品概述
 
1955年,Eagle博士发布了细胞基础培养基配方,并指出培养基是“一个包含无机盐、糖、氨基酸、维生素及其他必须营养物质的等渗透压且具有pH缓冲能力的混合物”。培养基作为细胞生长的环境和营养物质来源,对其组成成分、投料化合物含量配比及在细胞培养过程中含量变化进行检测具有重要意义。
 
因此,几乎所有的生物制药公司、培养基生产商都有不同程度的投入人力和物力,以开发培养基重要成分的检测方法。但是,目前普通的培养基成分的检测流程过于复杂,需要使用不同的仪器、不同的方法进行测定,这种检测流程已不能满足工业化快速、标准化要求。而液质联用技术因其具有高通量,专属性强的特点,使其能够很好的解决普通检测流程出现的问题。BIOTREE将采用SCIEX公司推出的 “利用LC-MS/MS同时测定细胞上清液中106种化合物”方法来进行培养基中化合物的测定。
 
培养基消耗分析原理概述
 
首先,该方法采用正负切换模式、一针进样即可在20分钟内实现细胞培养基/上清液中6种糖、39种氨基酸、19种维生素、18种核苷酸以及其他24种代谢相关物质共106种化合物的同时分析。
 
其次,该方法为内标绝对定量方法,106种化合物的相关系数r均大于0.99,可获得长时间跨度的投料化合物样本的绝对浓度,易于比较;在没有标准品的情况下,也可将该方法应用于短时间或同批次样本的相对定量研究。
 
最后,利用SCIEX独有的Scheduled MRM™模式,保证了所有化合物具有足够的扫描点数,从而保证峰形和灵敏度,方便增加更多的化合物。
 
方法优势
 
1. MRM模式,高专属性,一种仪器即可完成糖类、氨基酸、维生素、有机酸等106种化合物的同时检测。
 
2.采用正负切换模式,一针进样,仅需20 分钟。
 
3.采用Scheduled MRM™模式,提供保留时间,保证峰形和灵敏度,后期方便增加更多化合物。
 
4.灵敏度高,前处理简单,稀释进样。
 
5.考察了106种化合物的线性范围,线性相关系数r均大于0.99。
 
6.方法稳定:高盐溶液正负切换模式下仪器稳定,样品检测重现性好。
 
7.内标法绝对定量,一种方法满足绝对定量和相对定量需求。
 
技术流程
 
代谢组学
培养基消耗分析技术路线
 
分析内容
 
数据处理
对原始数据进行峰解卷积,积分,峰对齐,标准化处理。通过原始总离子流(TIC)色谱图,初步观察仪器的保留时间重现性,所测得物质的情况。
 
代谢组学
106种化合物的提取离子流色谱图(XIC/EIC)
 
定量及统计分析
通过标准曲线计算样品中不同物质的定量结果,并结合学氏T检验统计组间差异表达的化合物。
 
Box-Plot分析
箱形图(Box-plot)又称为盒式图或箱线图,是一种用作显示一组数据分散情况资料的统计图。对所有差异的化合物进行Box-plot分析能直观的反应各组样本之间的代谢物差异和组内样本之间的变异度大小。箱线图的绘制方法是先找出一组数据的最大值、最小值、中位数和两个四分位数,然后连接两个四分位数画出箱子,再将最大值和最小值与箱子相连接,中位数在箱子中间。
 
代谢组学
Box-plot分析(示意图)
 
结尾
 
确认过产品,是心动的感觉?
还不快来一起测一测,BIOTREE为您的实验保驾护航!
检测物简表如下
 
代谢组学
 
欲知详情,请联系我们哟~笔芯~
 
代谢组学
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