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技术介绍 | 乙酰化修饰蛋白组学

分类:
阿趣动态
发布时间:
2021/11/24 15:28
浏览量

添加在蛋白赖氨酸残基或蛋白N端上的过程,在调控蛋白质功能、染色质结构和基因表达中起重要作用。

 

乙酰化修饰主要分为两类:蛋白N端的乙酰化修饰和蛋白赖氨酸上的乙酰化修饰。N端乙酰化修饰大部分发生在真核生物的蛋白上,由N乙酰转移酶(NATs)催化;赖氨酸上的乙酰化修饰是一个可逆的过程,主要由赖氨酸乙酰化酶(KATs)和赖氨酸去乙酰化酶(KDACs)催化。

 

应用方向

  • 乙酰化修饰与细胞基因表达调控、表观调控、细胞凋亡、细胞代谢、信号转导、蛋白质稳定性等生理过程研究;
  • 乙酰化引起的代谢疾病、代谢紊乱,肿瘤发生等疾病机理研究。

 

乙酰化生物学意义

调节DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用;

与其他PTMs发生crosstalk;

调节酶活性;

调控蛋白亚细胞定位。

 

实验流程

定量乙酰化修饰组学实验流程

技术参数

 

寄样要求

动物及临床组织标本:200 mg/sample

血清、血浆:500 uL/sample

细胞﹑微生物:1× 108cells/sample

植物嫩叶、嫩芽:10g/sample

植物种子、果实:10g/sample

液氮或-80℃保存

足量干冰运输,避免反复冻融

 

案例分享

Title(标题):Fungal-induced protein hyperacetylation in maize identified by acetylome profiling

发表期刊:PNAS

影响因子:9.504

技术方法:iTRAQ、乙酰化修饰定量蛋白组

 

研究内容

赖氨酸乙酰化是一种关键的翻译后修饰,调节一系列生物过程中涉及的多种蛋白质。已知编码乙酰转移酶的病原体效应蛋白可以直接乙酰化宿主蛋白从而改变免疫过程。胭脂虫毒素(HCT),一种由真菌玉米圆斑病菌种1(C. carbonum race 1)产生的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,可以增强病原体感染玉米植物的能力。

 

组蛋白乙酰化状态的改变在宿主-病原体相互作用中起着核心作用。关于HCT如何实际促进毒性的机理仍然未知。因此作者选择hmlA玉米突变株作为研究对象,该突变株是编码依赖NADPH的HC-毒素还原酶(HCTR)缺陷型,不能使HCT失活,表现出对C. carbonum race 1的易感。应用iTRAQ标记蛋白组和乙酰化修饰蛋白组技术研究玉米真菌诱导机制。

 

富集抗体

Anti-acetyl-lysine antibody(lmmuneChem-lCP0388)

 

技术路线

 

 

研究结果

发生乙酰化修饰的玉米蛋白

 

有兴趣采用乙酰化修饰蛋白组学进行样本检测分析的老师,欢迎垂询服务热线:400-664-9912,也可在本文或微信公众号后台给我们留言。

 

参考文献下载链接
https://pan.baidu.com/s/1hbW_MxElgSSpaWoNpZ61qw提取码:srng

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