产品简介平行反应监测(parallel Reaction Monitoring, PRM)是一种与MRM技术类似的靶向检测方法，两者不同之处在于PRM使用高分辨的质谱仪(Q Orbitrap/Q TOF)，能显著降低背景杂质干扰，提高检测的选择性和特异性。能够对目标蛋白质、目标肽段（或发生翻译后修饰的肽段）进行选择性检测，从而实现对目标蛋白质/肽段进行相对（绝对）定量。PRM技术基于Orbitrap为代表的高分辨、高精度质谱平台，首先利用四级杆质量分析器的选择能力，用Q1选择目标肽段的母离子，随后在collision cell 中对母离子进行碎裂，最后利用Orbitrap分析器在二级质谱中检测所选择的母离子窗口内的所有碎片信息。这样即可对复杂样本中的目标蛋白质/肽段进行准确地特异性分析，可实现相对定量（目的同WB）/绝对定量（目的同Elisa）分析。
应用方向
验证修饰和非修饰定量蛋白组学结果
目标蛋白/肽段相对定量和绝对定量分析
技术流程
技术参数▶ 产品类型
PRM靶向定量蛋白组
▶ 仪器平台
Orbitrap 系列, Thermo/Tims TOF Pro2, Bruker
▶ 搜库软件
Proteome Discoverer / MaxQuant/Skyline
寄样要求▶ 样本要求
动物组织标本：100 mg/sample
血清、血浆：200 μL/sample
细胞、微生物：1×107 cells/sample
液氮或-80°C保存
足量干冰运输，避免反复冻融
技术对比▶ PRM
抗体依赖：无需抗体，可直接对样本中目标蛋白质进行定量分析
特异性：高，靶向检测目标蛋白对应的肽段
准确度：高，相对定量/绝对定量
可靠性：高，可同时分析蛋白上数个unique肽段
灵敏度：1 attomol
通量：高，一次检测多个蛋白
▶ Western Blot/ELISA
抗体依赖：对抗体有依赖性，如无成品抗体需要定制
异性：难以把控，受限于抗体的特异性
准确度：WB“灰度值，相对定量”；ELISA“绝对定量，受限于抗体特异性”
可靠性：低，单抗只针对一个抗原表位进行检测
灵敏度：高，0.1 attomol
通量：低，一次只能检测一个蛋白
医学方向—案例分析▶ Identification of a Blood-Based Protein Biomarker Panel for Lung Cancer Detection
期刊： Cancers
影响因子： 6.126
技术方法： PRM 技术
▶ 研究内容
肺癌是世界上最致命的癌症，主要是由于它在诊断时处于晚期。非侵入性的早期检测方法仍然是提高患者生存率的必要手段。本文采用液相色谱-平行反应监测(LC-PRM)质谱法测定128例肺癌患者和93例健康献血者血浆中351种蛋白质的水平，通过生信分析寻找最佳蛋白组合用于预测。确定了血浆中6个蛋白质作为肺癌的潜在诊断工具，并在48名患者和49名健康志愿者中得到验证。作为高风险和中等风险人群的常规检查，它可以补充目前在肺癌筛查中采用的技术。
农学方向—案例分析▶ Divergent responses of Atlantic coastal and oceanic Synechococcus to iron limitation
期刊： Proc Natl Acad Sci U S A
影响因子： 9.412
技术方法： Label free蛋白质、PRM靶向蛋白组
▶ 研究内容
海洋聚球藻是种类最丰富、分布最广的浮游植物之一，而铁(Fe)是一种重要的微量营养素，限制了海洋许多地区的生产力。为了研究沿海和海洋大西洋聚球藻菌株如何适应铁的有效性，我们比较了来自不同铁环境的两个聚球藻菌株的生长、光生理学和定量蛋白质组学。聚球藻菌株WH8102来自马尾藻海南部的一个区域，该区域有大量的灰尘沉积，随着铁含量的下降，其生长和光生理学表现出受损，但很少使用驯化反应。来自动态、季节性变化的新英格兰大陆架的沿海WH8020显示了具有不同铁阈值的多层次、分级的适应反应级联。多层次的反应包括铁的获取、储存和光合蛋白质的变化，黄氧毒素替代铁氧还蛋白，以及改良的光生理学，同时在一定范围内保持显著稳定的生长速率。
▶ 技术路线
▶ 研究成果
