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N-糖基化修饰蛋白组学
产品简介  产品简介

蛋白质的糖基化修饰是生物体内发生最为普遍也最复杂的翻译后修饰类型。在真核细胞内,约50%的蛋白质都会发生糖基化修饰。最常见的两种糖基化修饰为N-连接糖基化修饰和O-连接糖基化修饰。
糖基化在生物体内起着重要的作用:对细胞具有保护、稳定、组织及屏障等多方面作用;可作为外源性受体的特异性配体,某些糖链可作为各种病毒、细菌及寄生物的特异受体;糖链也可作为内源性受体的特异性配体,参与介导清除、周转及胞内穿行作用;糖链在受精过程中起着重要的作用。
在诸多发展成熟的糖基化富集技术中,亲水相互作用色谱法(ZIC-HILIC)是公认普适性最广且能保持糖链结构完整性的技术手段之一。

N-糖基化修饰蛋白组学(图2)

N糖主要种类N糖主要种类

常见的N糖糖型有:Higgmannose(高甘露糖型)、Complex/Hybrid(复杂型/杂合型)、Sialylation(唾液酸型)、Fucosylation(岩藻糖型)、Xylosed(木糖型)、Glycan-phose(磷酸化修饰型(M6P)

N-糖基化修饰蛋白组学(图4)

N-糖基化修饰蛋白组学(图5)

技术流程技术流程


N-糖基化修饰蛋白组学(图7)

技术参数技术参数

▶ 产品类型

N-定量糖基化修饰组学

▶ 仪器平台

Orbitrap系列, Thermo/Tims TOF Pro2, Bruker

▶ 搜库软件

pFind Studio

寄样要求寄样要求

▶ 样本要求

细胞:5×107 cells/sample

动物组织:1 g/sample

血液样本:1 ml(注意用EDTA防凝)/sample

血清:1 ml/sample

尿液:2 ml/sample

酵母/微生物:200 g/sample

液氮或-80°C保存

足量干冰运输,避免反复冻融

案例分析医学方向—案例分析

▶ Integrative glycoproteomics reveals protein N-glycosylation aberrations and glycoproteomic network alterations in Alzheimer's disease

期刊:                             Sci Adv

影响因子:                      14.957

技术方法:                      N-糖基化修饰定量蛋白质组学

▶ 研究内容

糖基化缺陷是许多神经系统疾病的重要特征,但对其在阿尔兹海默症(Alzheimer's disease, AD)中全系统变化的了解仍非常有限。该研究描述了一项大规模的针对特定位点的N-糖蛋白组图谱研究,利用基于高分辨质谱的N-糖基化修饰蛋白质组的方法来表征AD患者及其对照大脑样本中N-糖蛋白和体内N-糖基化位点的系统级全景图。文章鉴定了1132个N-糖蛋白和2294个N-糖基化位点,整合构建了N-糖肽/糖蛋白共调节网络,在分子和系统水平为理解和治疗AD提供了新的见解。

▶ 研究成果

研究内容


案例分析农学方向—案例分析

▶ N-glycosylation Site Analysis Reveals Sex-related Differences in Protein N-glycosylation in the Rice Brown Planthopper (Nilaparvata lugens)

期刊:                             Mol Cell Proteomics

影响因子:                      7.381

技术方法:                      N-糖基化修饰蛋白质组学

▶ 研究内容

糖基化是一种常见的蛋白质修饰,在广泛的生物学过程中起着至关重要的作用。在人类、线虫和吸虫中已经观察到蛋白质糖基化的性别差异,该研究在水稻害虫褐飞虱中也发现了蛋白质糖基化的差异。通过对褐飞虱成虫的N-糖基化位点进行了全面的研究,在糖肽水平上进行了性别间的定性和定量比较。鉴定了来自600多个糖蛋白的1300多个N-糖基化位点,N-糖肽的比较分析揭示了两性之间N-糖基化的显著差异。为了解褐飞虱的生物学提供了新的见解,并为未来的生物防治策略提供了信息。

N-糖基化修饰蛋白组学(图13)

▶ 技术路线

N-糖基化修饰蛋白组学(图14)


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