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泛素化修饰蛋白组学
产品简介产品简介

蛋白质泛素化(Ubiquitination)是蛋白质在一系列特殊酶的作用下,被泛素(ubiquitin,76个氨基酸组成的多肽)共价修饰的过程,泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物80%~90%蛋白质的降解,在几乎所有的真核细胞活动中起着关键作用,是一种重要的翻译后修饰。

应用方向应用方向
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    泛素-蛋白酶体降解通路参与的各类生理过程研究
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    泛素-蛋白酶体降解通路调控异常引起疾病的发生等研究


生物学意义生物学意义

1、调节DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用

2、与其他PTMs发生crosstalk

3、调节酶活性

4、调控蛋白亚细胞定位

泛素化过程泛素化过程

泛素蛋白经活化后特异性连接到底物蛋白上

底物蛋白被蛋白酶体降解

泛素蛋白回收利用

泛素化过程

泛素化过程

技术流程


泛素化修饰蛋白组学技术流程

CST泛素化肽富集抗体:Ubiquitin Remnant Motif (K-ε-GG) Kit #14482

技术参数

产品类型

泛素化修饰蛋白组学

仪器平台

Orbitrap 系列(Q Exactive HFX, Thermo/Orbitrap Exploris 240, Thermo 等)

搜库软件

Proteome Discoverer / MaxQuant

样本要求

细胞、微生物 1×108 cells/sample
血清、血浆 1.5mL/sample
动物组织标本 2g/sample
植物嫩叶、嫩芽 10g/sample
植物种子、果实 20g/sample

液氮或-80°C保存

足量干冰运输,避免反复冻融

案例分析案例分析

Integrative proteomics reveals an increase in non-degradative ubiquitylation in activated CD4+ T cells

期刊: Nat Immunol
影响因子: 23.53
技术方法: 泛素化修饰定量蛋白组、蛋白组、转录组

研究内容

越来越多的证据表明泛素化可以直接导致非降解性的结果,但大多数关于T细胞泛素化的研究都集中在降解上。本文作者通过整合小鼠原代CD4+T细胞的蛋白质组和转录组数据,建立一个框架来预测泛素化引起的降解性或非降解性结果。二甘氨酸残基分析用于揭示泛素化的蛋白质,结合全细胞蛋白质组和转录组数据可以预测蛋白质的降解。通过二甘氨酸残基法鉴定泛素化蛋白的分析表明,CD4+T细胞的激活导致非降解性泛素化的增加。这与非蛋白酶体靶向的K29、K33和K63多泛素链的增加有关。本项研究揭示了1,200多种蛋白质在小鼠原代CD4+T细胞中泛素化,并强调了非蛋白酶体靶向泛素链在T细胞信号转导中的相关性。

技术路线

技术路线

实验结果


实验结果

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